Le but de cette ECUE est de se placer dans les conditions réelles de travail d’un technicien de laboratoire par une mise en situation.
Dans le contexte d'un laboratoire qui vient de recevoir deux nouveaux plasmides et une nouvelle lignée cellulaire, il s'agit, au sein de l’équipe de vérifier la carte de restriction des plasmides et de préciser les conditions de culture de cette nouvelle lignée cellulaire.
En pratique, les expériences à mettre en oeuvre couvrent :
- La mise au point des conditions de culture de lignées cellulaires
- L'étude de l’impact des conditions de culture sur la prolifération et la viabilité cellulaire
- L'observation en microscopie optique de la morphologie des différents types cellulaires
- L'utilisation d’un hématimètre pour dénombrer les cellules
- La préparation de bactéries porteuses d’un plasmide recombinant
- La purification d’ADN plasmidique
- La digestion des ADN plasmidiques par des enzymes de restriction
- La transfection de cellules eucaryotes pour vérifier la fonctionnalité du plasmide
Ces expériences sont à effectuer dans le cadre d'un travail mené en collaboration avec les autres participants et se concrétisent par la présentation des résultats obtenus à l’oral et dans un cahier de laboratoire.